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    你的位置:首页 > 技术文章 > 如何正确对DNA提取试剂盒进行保存和操作?

    技术文章

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      DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的,能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。C7H7Cl具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化,从而破坏细胞壁的特性。
     
      DNA提取试剂盒的保存方式:
     
      室温。低温保存可能会有沉淀析出。如果发生析出现象,请于50℃溶解后,再于室温保存。
     
      DNA提取试剂盒的操作方法:
     
      全套操作约需1小时,分匀浆、细胞裂解、除蛋白、DNA纯化等步骤,详细说明如下。
     
      匀浆和细胞裂解:
     
      使用不同的实验材料需采用不同的匀浆步骤,具体说明如下:
     
      【从动物组织中提取基因组DNA】
     
      使用研钵进行匀浆时:
     
      ① 取1~100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的研钵中,快速用力展研成匀浆。
     
      注)下列组织请加液氮研磨至粉末状。
     
      A.富含DNA酶的胰脏、脾脏、胸腺、淋巴等组织。
     
      B.富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等组织。
     
      C.富含角质蛋白的组织或坚硬的组织(如骨骼)等。
     
      ② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,温和研磨30秒钟。
     
      注)使用上述①-注)的实验材料时,请在加入Solution A及RNase A1后,将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。
     
      ③ 收集650 μl研磨好的组织匀浆液移至Collection Tube中。如果匀浆体积不足650 μl,请补充Solution A至650 μl,65℃保温5分钟。
     
      使用研磨棒进行匀浆时:
     
      ① 取1~100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的Collection Tube 中,用研磨棒快速研磨成糊状。
     
      ② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成匀浆。
     
      ③ 加入350 μl的Solution A将研磨棒上的匀浆冲入Collection Tube中,充分振荡混合后,65℃保温5分钟。
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